RT-LAMP Colormetric (bola liofilizada)
Este produto contén tampón de reacción, mestura de enzimas RT (ADN polimerase Bst e transcriptase inversa resistente á calor), protectores liofilizados e compoñentes de colorante cromoxénico.O produto é tipo bola liofilizada, só se utiliza con imprimacións e modelos.Este kit proporciona unha detección visual rápida e clara da amplificación, cuxa reacción negativa indícase en vermello e a reacción positiva indícase cun cambio a amarelo.
Compoñente
RT-LAMP Colormetric Master Mix (perlas liofilizadas)
Aplicacións
Para amplificación isotérmica de ADN o ARN.
Condicións de almacenamento
Transportado e almacenado a 2 ~ 8 ℃.O produto ten unha validez de 12 meses.
Protocolo
1.Saca o número correspondente de contas liofilizadas en po segundo o número de probas.
2.Prepare a mestura de reacción
Compoñente | Volume |
RT-LAMP Colormetric Master Mix (perlas liofilizadas) | 1 peza (2 contas) |
10 × mestura de imprimacióna | 5 μl |
Modelos ADN/ARN b | 45 μl |
Notas:
1. 10 × Concentración da mestura de imprimación: 16 μM FIP/BIP, 2 μM F3/B3, 4 μM Loop F/B;
2. Recoméndase disolver as plantillas de ácidos nucleicos usando auga DEPC.
3.Incubar a 65 °C durante 30-45 minutos, que se poden prolongar adecuadamente segundo o cambio de cor Tempo de reacción.
4.Segundo a simple vista, o amarelo foi positivo e o vermello negativo.
Notas
1.A temperatura de reacción pódese optimizar entre 62 ℃ e 68 ℃ segundo a condición do cebador.
2.Os reactivos envasados non deben estar expostos ao aire durante moito tempo.
3.A reacción de decoloración vermella e amarela depende do cambio de pH do sistema de reacción, non use a solución de almacenamento de ácido nucleico Tris que contén, recoméndase usar ddH2O ácido nucleico almacenado.
4.O experimento realizarase de forma estandarizada, incluíndo a preparación do sistema de reacción, o tratamento da mostra e a adición de mostras.
5.Suxírese preparar o sistema de reacción na mesa ultralimpa e engadir modelos na campana de extracción doutras salas para evitar falsos.