Reactivo de liberación da mostra
O reactivo de liberación de mostra é para escenarios de diagnóstico POCT molecular.Para os dous sistemas de LAMP de amplificación directa e PCR de amplificación directa, non hai necesidade de extracción de ácido nucleico.O lisado bruto da mostra pódese amplificar directamente, o xene obxectivo pódese detectar con precisión, o tempo de detección da mostra pódese acurtar aínda máis, o que se adapta perfectamente aos requisitos de aplicación do POCT molecular.É apto para hisopos nasais, hisopos de garganta e outros tipos de mostras.As mostras procesadas pódense usar directamente para a detección de PCR ou LAMP cuantitativa de fluorescencia en tempo real, e pódense conseguir os mesmos resultados que os métodos de extracción convencionais sen complicadas operacións de extracción de ácidos nucleicos.
Condicións de almacenamento
Transportar e almacenar a temperatura ambiente.
Control de calidade
Detección funcional: qPCR cuantitativa: amplificouse o sistema de reactivo de liberación de mostras de 800 μl
con 1000 copias Novel Pseudovirus, unha mostra de hisopo nasal, resultando curvas de amplificación similares eValores de ΔCt dentro de ± 0,5 Ct.
Procedemento Experimentalres
1. Tome 800 μl de reactivo de liberación de mostras e estenda a solución de lise nun tubo de mostraxe de 1,5 ml.
2. Tome o cotonete nasal ou o cotonete de garganta co cotonete; Procedemento de mostraxe de cotonete nasal: tome o cotonete estéril e colócao nas fosas nasais, avance lentamente ata uns 1,5 cm de profundidade, xire suavemente 4 veces contra a mucosa nasal durante máis de 15 segundos. , A continuación, repita a mesma operación na outra cavidade nasal co mesmo cotonete.Procedemento de mostraxe de cotonete de garganta: tome o cotonete estéril e limpe suavemente as amígdalas farínxeas e a parede farínxea posterior 3 veces.
3.Coloque o hisopo inmediatamente no tubo de mostraxe.A cabeza do hisopo debe xirar e mesturarse na solución de almacenamento durante polo menos 30 segundos para garantir que a mostra estea completamente eluída no tubo de mostraxe.
4. Incubación a temperatura ambiente (20 ~ 25 ℃) durante 1 min, a preparación do tampón de lise está rematada.
5. Tanto a RT-PCR do sistema de 25 μl como a RT-LAMP eran compatibles cunha cantidade de 10 μl de adición de molde para experimentos de detección.
Notas
1. A cantidade mínima de lisado directo de mostra correspondente a un único hisopo pódese axustar a 400μl, que se pode axustar segundo as necesidades da proba.
2. Unha vez que a mostra sexa procesada polo reactivo de liberación da mostra, recoméndase realizar a seguinte fase da proba o antes posible, o intervalo de tempo de espera é preferiblemente inferior a 1 hora.
3. O pH do lisado da mostra é ácido e o sistema de detección debe ter un determinado tampón.É adecuado para a maioría da detección de fluorescencia por PCR, RT-PCR e LAMP con tampón de pH, pero non é apto para a detección colorimétrica de LAMP sen tampón.
