Grao Ultra Nuclease GMP
Número de Cat: HC2016A
O grao GMP de UltraNuclease exprésase e purifícase en Escherichia coli (E. coli) mediante enxeñaría xenética e preparado en ambientes GMP.Pode reducir a viscosidade do sobrenadante celular e do lisado celular na investigación científica, aumentar a eficiencia da purificación de proteínas e mellorar a investigación funcional das proteínas.O produto tamén pode reducir os residuos de ácidos nucleicos do hóspede a grado pg, mellorando o rendemento e a seguridade dos produtos biolóxicos de aplicacións, incluíndo a purificación de virus, a fabricación de vacinas e a fabricación de proteínas/polisacáridos farmacéuticos.Ademais, o produto tamén se pode aplicar para evitar a acumulación de células mononucleares do sangue periférico humano (PBMC) na terapia celular e no desenvolvemento de vacinas.
UltraNuclease ofrécese en forma de reactivo esterilizado, eluído en tampón (20 mM Tris-HCL pH 8,0, 2 mM MgCl, 20 mM NaCl, 50% glicerina), coa aparencia dun líquido transparente e incoloro.Este produto prodúcese segundo os requisitos do proceso GMP e ofrécese en forma líquida.
Compoñentes
Grao UltraNuclease GMP (250 U/μL)
Condicións de almacenamento
O produto envíase con xeo seco e pódese almacenar a -25 ℃ ~ -15 ° C durante dous anos.
Se o produto está aberto e gardouse a 4 ℃ durante máis dunha semana, recomendamos filtraro produto para evitar a contaminación microbiana.
Especificacións
| Expresión Host | E. coli recombinante con xene UltraNuclease |
| Peso Molecular | 26,5 kDa |
| punto soeléctrico | 6,85 |
| Pureza | ≥99 % (SDS-PAGE) |
| Buffer de almacenamento | Tris-HCL 20 mM pH 8,0, MgCl 2 mM, NaCl 20 mM, glicerina 50 % |
|
Definición da unidade | A definición dunha unidade de actividade (U) é a cantidade de encima utilizadacambiar o valor de absorción de ΔA260 en 1,0 en 30 minutos nun 2,625 mLsistema de reacción a 37 ℃ cun pH de 8,0 (equivalente á dixestión completa de37 μg de ADN de esperma de salmón en oligonucleótidos). |
Instrucións
1. Mostra Colección
Células adherentes: eliminar o medio, lavar as células con PBS e eliminar o sobrenadante.
Células de suspensión: recoller as células por centrifugación, lavar as células con PBS, centrifugar a 6.000rpm durante 10 min, recoller o pellet.
Escherichia coli: recoller as bacterias por centrifugación, lavar unha vez con PBS, centrifugar a 8.000rpm durante 5 min, e recolle o pellet.
2. Tratamento da mostra
Trate os gránulos celulares recollidos con tampón de lise na proporción de masa (g) e volume (ml) 1: (10-20), ou mediante métodos mecánicos ou químicos en xeo ou a temperatura ambiente (1 g de sedimento celular contén aproximadamente
109 celas).
3. Tratamento enzimático
Engade 1-5 mM de MgCl ao sistema de reacción e axusta o pH a 8-9.
Engade UltraNuclease segundo a proporción de 250 unidades para dixerir 1 g de gránulos celulares, incuba a 37 ℃ durante máis de 30 minutos.Consulte o formulario "Tempo de reacción recomendado" para escollerduración do tratamento.
4. Sobrenadante Colección
Centrifugar a 12.000 rpm durante 30 minutos e recoller o sobrenadante.
Nota: se a solución é ácida ou alcalina, ou contén altas concentracións de sal, deterxentes oudesnaturalizantes, por favor, aumente a dose de encima ou estenda o tempo de tratamento en consecuencia.
Condicións de reacción recomendadasons
| Parámetro | Condición óptima | Condicionador efectivo |
| Mg² + concentración | 1-5 mm | 1-10 mM |
| pH | 8-9 | 6-10 |
| Temperatura | 37 ℃ | 0-42 ℃ |
| Concentración TDT | 0-100 mM | > 0 mm |
| Concentración de mercaptoetanol | 0-100 mM | > 0 mm |
| Concentración de cationes monovalentes | 0-20 mM | 0-150 mM |
| Concentración de fosfato | 0-10 mM | 0-100 mM |
Recomendado Reacción Tempo (37 ℃, 2 mM Mg²+, pH 8.0)
| Cantidade de ultranuclease (concentración final) | Tempo de reacción |
| 0,25 U/ml | >10 h |
| 2,5 U/ml | > 4 h |
| 25 U/ml | 30 min |
Notas:
Use o EPI necesario, como bata de laboratorio e luvas, para garantir a súa saúde e seguridade.
