DNase I (Libre de Rnases) (2u/ul)
Número de Cat: HC4007B
A DNase I é unha endonuclease que pode dixerir ADN monocatenario ou bicatenario.Pode hidrolizar enlaces fosfodiéster para producir mono e oligodesoxinucleótidos que conteñen un grupo 5'-fosfato e un grupo 3'-OH.O intervalo óptimo de pH de traballo da DNase I é de 7-8.A actividade da DNase I depende do Ca2+e pode ser activado por ións metálicos divalentes como o CO2, Mn2+, Zn2+, etc En presenza de Mg2+, A DNase I pode escindir aleatoriamente calquera sitio de ADN de dobre cadea;Mentres en presenza de Mn2+, A DNase I pode cortar o ADN de dobre cadea no mesmo sitio, formando extremos romos ou extremos pegajosos con 1-2 nucleótidos que sobresaen.Pódese usar para o procesamento de varias mostras de ARN.
Compoñentes
Nome | 1KU | 5KU |
DNaseI recombinante (libre de RNase) | 500 μl | 5 × 500 μl |
Tampón de reacción DNase I (10×) | 1 ml | 5 × 1 ml |
Condicións de almacenamento
Este produto debe almacenarse a -25 ~ -15 ℃ durante 2 anos.Evite a conxelación e desconxelación repetidas.
Instrucións
Aplícase á eliminación de ADN de mostras de ARN só como referencia.
1. Use tubos de centrífuga sen RNase e puntas de pipeta para preparar o seguinte sistema de reacción:
Compoñentes | Volume (μl) |
Tampón de reacción DNase I (10×) | 1 |
ADNasel recombinante (libre de RNase) | 1 |
ARN | X |
ddH libre de RNase2O | Ata 10 |
2. As condicións de reacción son as seguintes: 37 ℃, despois de 15-30 minutos, engade unha concentración final de solución de EDTA 2,5 mM e mestura ben, despois 65 ℃ durante 10 minutos.O modelo procesado pódese usar para posteriores experimentos de RT-PCR ou RT-qPCR, etc.
Notas
1. A DNase l é sensible á desnaturalización física;Ao mesturar, inverte suavemente o tubo de ensaio eaxitar ben, non axitar con forza.
2. A encima debe almacenarse nunha caixa de xeo ou nun baño de xeo cando se usa, e debe almacenarse a -20 ℃ inmediatamente despois do uso.
3. Este produto é só para uso de investigación.
4. Por favor, opere con batas de laboratorio e luvas desbotables, para a súa seguridade.