Robustart Taq ADN polimerase

Robustart Taq DNA Polymerase é unha ADN polimerase de inicio en quente.Este produto non só pode inhibir mellor a reacción inespecífica causada polo recocido inespecífico de cebadores ou a agregación de cebadores no proceso de preparación e amplificación do sistema de PCR.Polo tanto, ten unha excelente especificidade e é máis eficaz para a amplificación de modelos de baixa concentración, e é adecuado para a reacción de amplificación de PCR multiplexada.Ademais, este produto ten unha moi boa aplicabilidade e pódense obter resultados de amplificación estables en diferentes tipos de reaccións de PCR.

Compoñentes

1.5 U/μL ADN polimerase de Robustart Taq

2.10 × PCR Buffer II (libre de Mg²+) (opcional)

3.MgCl 25 mM₂(opcional)

* 10 × PCR Buffer II (libre de Mg²+) non contén dNTP e Mg²+, engade dNTP e MgCl₂ao preparar o sistema de reacción.

Aplicacións recomendadas

1.Amplificación rápida.

2.Amplificación múltiple.

3.Amplificación directa de sangue, hisopos e outras mostras.

4.Detección de enfermidades respiratorias.

Condición de almacenamento

-20 °C para almacenamento a longo prazo, debe mesturarse ben antes do seu uso, evitando conxelación e desconxelación frecuentes.

*Se a precipitación ocorre despois da refrixeración, é normal;recoméndase equilibrar a temperatura ambiente antes de mesturar e usar.

Definición da unidade

Unha unidade activa (U) defínese como a cantidade de encima que incorpora 10 nmol de desoxirribonucleótido a material insoluble en ácido a 74 °C durante 30 minutos usando ADN de esperma de salmón activado como molde/cebador.

Control de calidade

1.Pureza electroforética SDS-PAGE superior ao 98%.

2.Sensibilidade de amplificación, control de lote a lote, estabilidade.

3.Sen actividade de nuclease esóxena, ningunha endonuclease esóxena ou contaminación por exonuclease

Instrucións

Configuración de reacción

Notas:

1) a.O búfer non contén dNTP e Mg²+, engade dNTP e MgCl₂ao preparar o sistema de reacción.

2) b.Se se usa para qPCR/qRT-PCR, deberían engadirse sondas fluorescentes ao sistema de reacción.Normalmente, unha concentración final de cebador de 0,2 μM dará bos resultados;se o rendemento da reacción é pobre, a concentración do cebador pódese axustar no intervalo de 0,2-1 μM.A concentración da sonda adoita optimizarse no intervalo de 0,1-0,3 μM.Pódense realizar experimentos de gradiente de concentración para atopar a mellor combinación de cebador e sonda.

Protocolo de ciclo térmico

Notas

1.A taxa de amplificación da ADN polimerase rápida non debe ser inferior a 1 kb/10 s.A taxa de aumento e descenso da temperatura, o modo de control de temperatura e a eficiencia de condución de calor dos diferentes instrumentos de PCR varían moito, polo que se recomenda optimizar as condicións de reacción óptimas para o instrumento de PCR rápido específico.

2.O sistema é altamente adaptable, cunha maior especificidade e sensibilidade.

3.Adecuado para o seu uso como reactivos de detección de PCR de alta sensibilidade e pódese usar en reaccións de amplificación de PCR múltiple.

4.actividade polimerase 5′→3′, actividade exonuclease 5′→3′;sen actividade exonuclease 3′→5′;sen función de corrección.

5.Adecuado para probas cualitativas e cuantitativas de PCR e RT-PCR.

6.O extremo 3′ do produto da PCR é A, que se pode clonar directamente nun vector T.

7.O método de tres pasos recoméndase para cebadores con baixas temperaturas de recocido ou para amplificación de fragmentos de máis de 200 pb.