One Step Fast RT-qPCR Probe Premix-UNG
Número de Cat: HCR5143A
One Step RT-qPCR Probe Kit (FOR FAST) é un kit de detección rápida de RT-qPCR baseado en sondas axeitado para a PCR cuantitativa single-plex ou multiplex usando ARN como molde (como virus de ARN).Este produto utiliza unha nova xeración de ADN polimerase Taq modificada con anticorpos e unha transcriptase inversa dedicada nun paso, cun tampón optimizado para unha amplificación rápida, que ten unha velocidade de amplificación máis rápida, unha maior eficiencia e especificidade de amplificación.Soporta amplificación equilibrada tanto en single-plex como multiplex de mostras de baixa e alta concentración en pouco tempo.
Compoñentes
1. 5×RT-qPCR buffer (U+)
2. Mestura enzimática (U+)
Notas:
a.O tampón 5×RT-qPCR (U+) inclúe dNTP e Mg2+;
b.A mestura enzimática (U+) inclúe transcriptase inversa, ADN polimerase Taq de inicio en quente, inhibidor da RNase e UDG;
c.Use puntas sen RNase, tubos EP, etc.
Antes do uso, mestura ben o tampón 5×RT-qPCR (U+).Se hai algunha precipitación despois da desconxelación, agarda a que o tampón volva á temperatura ambiente, mestúrase e disolva, e despois utilízao normalmente.
Condicións de almacenamento
O produto envíase con xeo seco e pódese almacenar a -25 ~ -15 ℃ durante 1 ano.
Instrucións
1. Reacción Sistema
| Compoñentes | Volume (20 μl reacción) |
| 2 × RT-qPCR tampón | 4 μl |
| Mestura enzimática (U+) | 0,8 μl |
| Primer Dianteiro | 0,1 ~ 1,0 μM |
| Primer reverso | 0,1 ~ 1,0 μM |
| Sonda TaqMan | 0,05 ~ 0,25 μM |
| Modelo | X μL |
| Auga sen RNase | ata 25 μl |
Notas: O volume de reacción é de 10-50 μL.
2. Protocolo de Ciclismo (Sestándar)
| Ciclo paso | Temp. | Tempo | Ciclos |
| Transcrición inversa | 55 ℃ | 10 min | 1 |
| Desnaturalización inicial | 95 ℃ | 30 seg | 1 |
| Desnaturalización | 95 ℃ | 10 seg | 45 |
| Recocido/Extensión | 60 ℃ | 30 seg |
| Protocolo de Ciclismo (Rápido) Ciclo paso |
Temp. |
Tempo |
Ciclos |
| Transcrición inversa | 55 ℃ | 5 min | 1 |
| Desnaturalización inicial | 95 ℃ | 5 s | 1 |
| Desnaturalización | 95 ℃ | 3 s | 43 |
| Recocido/Extensión | 60 ℃ | 10 s |
Notas:
a.A temperatura de transcrición inversa está entre 50 ℃ e 60 ℃, o aumento da temperatura axuda a amplificar estruturas complexas e modelos de alto contido en CG;
b.A temperatura de recocido óptima debe axustarse en función do valor de Tm do cebador e seleccionar o tempo máis curto para a recollida de sinal de fluorescencia baseándose no instrumento de PCR en tempo real.
Notas
Use o EPI necesario, como bata de laboratorio e luvas, para garantir a súa saúde e seguridade.
