Fosfatase alcalina (ALP)

A fosfatase alcalina deriva dunha cepa recombinante de E. coli que porta o xene TAB5.O encima cataliza a desfosforilación dos extremos 5´ e 3´ dos fosfomonoésteres de ADN e ARN.Ademais, hidroliza a ribosa, así como os desoxirribonucleósidos trifosfatos (NTPs e dNTPs).A fosfatasa alcalina TAB5 actúa nos extremos saíntes de 5', rebaixados 5' e romos.A fosfatase pode usarse en moitas aplicacións de bioloxía molecular, como a clonación ou o etiquetado dos extremos da sonda para eliminar os extremos fosforilados do ADN ou do ARN.Nos experimentos de clonación, a desfosforilación impide que o ADN plasmídico linealizado se autoliga.Tamén pode degradar os dNTP non incorporados nas reaccións de PCR para preparar un molde para a secuenciación do ADN.O encima inactivase de forma completa e irreversible quentando a 70 °C durante 5 minutos, polo que non será necesaria a eliminación da fosfatase antes da ligadura ou do etiquetado final.