Peroxidase (fonte de rábano picante) Sinónimo: peróxido de hidróxeno oxidorreductase;HRP

A peroxidase de rábano picante (HRP) está illada das raíces do rábano picante (Amoracia rusticana) e pertence ao grupo das ferroprotoporfirinas das peroxidasas.O HRP combínase facilmente co peróxido de hidróxeno (H2O2).O complexo [HRP-H2O2] resultante pode oxidar unha gran variedade de doadores de hidróxeno:
Doador + H2O2 → Doador oxidado + 2 H2O
O HRP oxidará varios substratos (consulte a táboa 1):
• Cromoxénicos
• Quimioluminiscente (como luminol ou isoluminol)
• Fluoroxénico (como tiramina, ácido homovanílico ou ácido 4-hidroxifenil acético)
HRP é un polipéptido de cadea única que contén catro pontes disulfuro.HRP é unha glicoproteína que contén un 18% de hidratos de carbono.A composición dos carbohidratos está formada por galactosa, arabinosa, xilosa, fucosa, manosa, manosamina e galactosamina, dependendo da isozima específica.

HRP é unha etiqueta moi utilizada para inmunoglobulinas en moitas aplicacións de inmunoquímica diferentes, incluíndo inmunotransferencia, inmunohistoquímica e ELISA.O HRP pode conxugarse con anticorpos por varios métodos diferentes, incluíndo glutaraldehido, oxidación do periodato, a través de enlaces disulfuro, e tamén mediante enlaces cruzados dirixidos a amino e tiol.O HRP é o marcador máis desexado para os anticorpos, xa que é o máis pequeno e estable dos tres marcadores enzimáticos máis populares (peroxidase, β-galactosidase, fosfatase alcalina) e a súa glicosilación conduce a unha menor unión inespecífica.Publicouse unha revisión dos métodos de conxugación de glutaraldehido e periodato.

A peroxidase tamén se utiliza para a determinación de glicosa4 e peróxidos en solución.Varias publicacións, 6-24 teses, 25-29 e disertacións 30-46 citaron o uso de P8375 nos seus protocolos de investigación.