Multiplex One Step RT-qPCR Premix
Descrición
Número de Cat: HCR5141A
Multiplex One Step RT-qPCR Premix é un kit de PCR cuantitativo multiplex baseado en ARN como molde.No experimento realízanse a transcrición inversa e a PCR cuantitativa no mesmo tubo de reacción, simplificando a operación experimental e reducindo o risco de contaminación.O deseño exclusivo da mestura de tampón e encima pódese usar nun sistema liofilizado dun só paso.O kit utiliza a transcriptase inversa resistente á calor para a síntese eficiente do ADNc da primeira cadea usando ADN polimerase Taq de inicio en quente para a amplificación cuantitativa.Contén tampón de reacción optimizado, mestura de encimas, etc., e engadíronse factores que inhiben eficazmente a amplificación da PCR inespecífica e melloran a eficiencia de amplificación de varias reaccións qPCR, permitindo a amplificación cuantitativa de fluorescencia múltiple ao tempo que garante a eficiencia de amplificación dos cebadores.
Compoñentes
| Nome |
| 1. Lyo-Buffer |
| 2. Mestura lyo-enzima |
| 3. Lyoprotector |
Condición de transporteión
A: Lyo-buffer e protector: -25 ~ -15 ℃, a vida útil é de 1 ano.
B: mestura de lioenzimas, 2-8 ℃, a vida útil é de 6 meses.
Instrución de funcionamento
1. Sistema de reacción (Tome 25 μL como exemplo)
| Compoñentes | Volume (μl) | Concentración final |
| Lyo-Buffer | 6 | 1* |
| Mestura lyo-enzima | 1 | - |
| Lyo-Protector | 8 | - |
| Mestura de imprimación (10 μM) | 1 | 0,1-1 uM |
| Mestura de sondas (10 μM) | 0,5 | 0,05-0,5 uM |
| Modelo de ARN | 5 | - |
| DEPC H2O | Ata 25 | - |
2. Protocolo de ciclismo optimizado
1) Protocolo estándar de ciclismo
| Etapa de reacción | Temperatura | Tempo | Ciclo | |
| 1 | Transcrición inversa | 50°Ca | 10 min | 1 |
| 2 | Desnaturalización inicial | 95°C | 5 min | 1 |
| 3 | Reacción de amplificación | 95°C | 15 seg | 45 ciclos |
| 60°Cb | 30 segc |
2) Protocolo de ciclismo rápido
|
| Etapa de reacción | Temperatura | Tempo | Ciclo |
| 1 | Transcrición inversa | 50°Ca | 2 min | 1 |
| 2 | Desnaturalización inicial | 95°C | 2 seg | 1 |
| 3 | Reacción de amplificación | 95°C | 1 seg |
45 ciclos |
| 60°Cb | 13 segc |
Nota:
a) Inversa transcrición: A temperatura pode seleccionar 42 °C ou 50 °C durante 10-15 minutos.
b) Reacción de amplificación: A temperatura axústase segundo o valor de Tm dos cebadores deseñados.
c)Fluorescencia sinal adquisición: Estableza o procedemento experimental segundo os requisitos domanual do instrumento.
Información técnica/Especificacións
| Inicio quente | Arranque en quente incorporado |
| Método de detección | Detección de sonda cebadora |
| Método PCR | RT-qPCR dun paso |
| Tipo de mostra | ARN |
Notas
1. Este produto é só para uso de investigación.
2. Use o EPI necesario, como bata de laboratorio e luvas, para garantir a súa saúde e seguridade!
