2×PCR Super Mix (con colorante)
2× PCR Master Mix contén Taq DNA Polymerase, dNTPs e outros compoñentes necesarios para PCR.O Master Mix é estable durante 3 meses a 4 ℃ cos nosos estabilizadores personalizados.A solución de premestura está optimizada para a PCR convencional e está lista para usar engadindo moldes de ADN e cebadores.Os produtos de PCR pódense cargar directamente para electroforese con colorante azul de bromofenol precargado.Os produtos amplificados conteñen unha protuberancia de 3'-dA e pódense clonar facilmente no vector T.O 2×PCR Master Mix simplifica o procedemento de PCR e reduce a contaminación.
Condicións de almacenamento
Os produtos deben almacenarse a -25 ℃ ~ -15 ℃ durante 2 anos.
Especificacións
Fidelidade (vs. Taq) | 1× |
Inicio quente | No |
Saínte | 3'-A |
Polimerase | Taq ADN polimerase |
Formato de reacción | SuperMix ou Master Mix |
Velocidade de reacción | Estándar |
Tipo de produto | PCR Master Mix (2x) |
Instrucións
1.Sistema de reacción
Compoñentes | Volume(μl) |
ADN modelo | Axeitado |
Cebador 1 (10 μmol/L) | 2 |
Cebador 2 (10 μmol/L) | 2 |
2 × PCR Master Mix | 25 |
ddH2O | ata 50 |
2.Protocolo de amplificación
Pasos do ciclo | Temperatura (°C) | Tempo | Ciclos |
Desnaturalización inicial | 94 | 5 min | 1 |
Desnaturalización | 94 | 30 seg | 35 |
Recocido | 50-60 | 30 seg | |
Extensión | 72 | 30-60 seg/kb | |
Ampliación final | 72 | 10 min | 1 |
Nota:
1) Uso do modelo: 50-200 ng de ADN xenómico;0,1-10 ng de ADN plasmídico.
2) Mg2+concentración: este produto contén 3 mM de MgCl2, axeitado para a maioría das reaccións de PCR.
3) Temperatura de recocido: consulte o valor de Tm teórico dos cebadores.A temperatura de recocido pódese configurar entre 2 e 5 ℃ por debaixo do valor teórico da imprimación.
4) Tempo de extensión: para a identificación molecular, recoméndase 30 seg/kb.Para a clonación de xenes, recoméndase 60 seg/kb.
Notas
1.Os produtos de PCR con 2× PCR Master Mix non son axeitados para a electroforese en xel de poliacrilamida.
2.Para a súa seguridade e saúde, use batas de laboratorio e luvas desbotables para operar.
3.Úsase SÓ para uso de investigación!