2×PCR Master Mix (sen colorante)
PCR Master Mix é unha especie de solución premesturada de PCR convencional que está lista para usar, incluíndo Taq DNA Polymerase, dNTP mix MgCl2 e tampón optimizado.Durante a reacción, só se poden engadir o cebador e o modelo para a amplificación, o que simplifica moito os pasos de operación do experimento.Este produto contén excelentes estabilizadores e pódese almacenar durante 3 meses a 4 ℃.O produto da PCR ten unha protuberancia de 3′-dA e pódese clonar facilmente no vector T.
Condicións de almacenamento
O produto debe almacenarse a -25 ℃ ~ -15 ℃ durante dous anos.
Especificacións
| Fidelidade (vs.Taq) | 1× |
| Inicio quente | No |
| Saínte | 3′-A |
| Polimerase | Taq ADN polimerase |
| Formato de reacción | SuperMix ou Master Mix |
| Velocidade de reacción | Estándar |
| Tipo de produto | PCR Master Mix (2×) |
Instrucións
1.Sistema de reacción
| Compoñentes | Tamaño (μL) |
| ADN modelo | Axeitado |
| Cebador 1 (10 μmol/L) | 2 |
| Cebador 2 (10 μmol/L) | 2 |
| Mix Master PCR | 25 |
| ddH2O | Ata 50 |
2.Protocolo de amplificación
| Pasos do ciclo | Temperatura (°C) | Tempo | Ciclos |
| Pre-desnaturalización | 94 ℃ | 5 min | 1 |
| Desnaturalización | 94 ℃ | 30 seg | 35 |
| Recocido | 50-60 ℃ | 30 seg | |
| Extensión | 72 ℃ | 30-60 seg/kb | |
| Ampliación Final | 72 ℃ | 10 minutos | 1 |
Notas:
1) Uso do modelo: 50-200 ng de ADN xenómico;0,1-10 ng de ADN plasmídico.
2) Mg2+concentración: este produto contén 3 mM de MgCl2 adecuado para a maioría das reaccións de PCR.
3) Temperatura de recocido: consulte o valor de Tm teórico dos cebadores.A temperatura de recocido pódese configurar entre 2 e 5 ℃ por debaixo do valor teórico da imprimación.
4) Tempo de extensión: para a identificación molecular, recoméndase 30 seg/kb.Para a clonación de xenes, 60recoméndase sec/kb.
Notas
1.Para a súa seguridade e saúde, use batas de laboratorio e luvas desbotables para operar.
2.Só para uso de investigación!
